來源:網(wǎng)絡(luò)資源 2021-12-14 20:50:41
顯微鏡的基本構(gòu)造
光學顯微鏡由目鏡,物鏡,粗準焦螺旋,細準焦螺旋,壓片夾,通光孔,遮光器,轉(zhuǎn)換器,反光鏡,載物臺,鏡臂,鏡筒,鏡座,聚光器,光闌組成。
顯微鏡分類
光學顯微鏡
通常皆由光學部分、照明部分和機械部分組成。無疑光學部分是最為關(guān)鍵的,它由目鏡和物鏡組成。早于1590年,荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類似顯微鏡的放大儀器。光學顯微鏡的種類很多,主要有明視野顯微鏡(普通光學顯微鏡)、暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡、偏光顯微鏡、微分干涉差顯微鏡、倒置顯微鏡。
電子顯微鏡
電子顯微鏡有與光學顯微鏡相似的基本結(jié)構(gòu)特征,但它有著比光學顯微鏡高得多的對物體的放大及分辨本領(lǐng),它將電子流作為一種新的光源,使物體成像。自1938年Ruska發(fā)明第一臺透射電子顯微鏡至今,除了透射電鏡本身的性能不斷的提高外,還發(fā)展了其他多種類型的電鏡。如掃描電鏡、分析電鏡、超高壓電鏡等。結(jié)合各種電鏡樣品制備技術(shù),可對樣品進行多方面的結(jié)構(gòu) 或結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的深入研究。顯微鏡被用來觀察微小物體的圖像。常用于生物、醫(yī)藥及微小粒子的觀測。電子顯微鏡可把物體放大到200萬倍。臺式顯微鏡,主要是指傳統(tǒng)式的顯微鏡,是純光學放大,其放大倍率較高,成像質(zhì)量較好,但一般體積較大,不便于移動,多應(yīng)用于實驗室內(nèi),不便外出或現(xiàn)場檢測。
便攜式顯微鏡
便攜式顯微鏡,主要是近幾年發(fā)展出來的數(shù)碼顯微鏡與視頻顯微鏡系列的延伸。和傳統(tǒng)光學放大不同,手持式顯微鏡都是數(shù)碼放大,其一般追求便攜,小巧而精致,便于攜帶;且有的手持式顯微鏡有自己的屏幕,可脫離電腦主機獨立成像,操作方便,還可集成一些數(shù)碼功能,如支持拍照,錄像,或圖像對比,測量等功能。
數(shù)碼液晶顯微鏡,最早是由博宇公司研發(fā)生產(chǎn)的,該顯微鏡保留了光學顯微鏡的清晰,匯集了數(shù)碼顯微鏡的強大拓展、視頻顯微鏡的直觀顯示和便攜式顯微鏡的簡潔方便等優(yōu)點。
掃描隧道顯微鏡
掃描隧道顯微鏡亦稱為“掃描穿隧式顯微鏡”、“隧道掃描顯微鏡”,是一種利用量子理論中的隧道效應(yīng)探測物質(zhì)表面結(jié)構(gòu)的儀器。它于1981年由格爾德·賓寧(G.Binning)及海因里希·羅雷爾(H.Rohrer)在IBM位于瑞士蘇黎世的蘇黎世實驗室發(fā)明,兩位發(fā)明者因此與恩斯特·魯斯卡分享了1986年諾貝爾物理學獎。
它作為一種掃描探針顯微術(shù)工具,掃描隧道顯微鏡可以讓科學家觀察和定位單個原子,它具有比它的同類原子力顯微鏡更加高的分辨率。此外,掃描隧道顯微鏡在低溫下(4K)可以利用探針尖端精確操縱原子,因此它在納米科技既是重要的測量工具又是加工工具。
STM使人類第一次能夠?qū)崟r地觀察單個原子在物質(zhì)表面的排列狀態(tài)和與表面電子行為有關(guān)的物化性質(zhì),在表面科學、材料科學、生命科學等領(lǐng)域的研究中有著重大的意義和廣泛的應(yīng)用前景,被國際科學界公認為20世紀80年代世界十大科技成就之一。
顯微鏡的使用方法
顯微鏡的使用
利用自然光源鏡檢時,最好用朝北的光源,不宜采用直射陽光;利用人工光源時,宜用日光燈的光源。
鏡檢時身體要正對實習臺,采取端正的姿態(tài),兩眼自然張開,左眼觀察標本,右眼觀察記錄及繪圖,同時左手調(diào)節(jié)焦距,使物象清晰并移動標本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時載物臺不可傾斜,因為當在五套載物臺傾斜時,液體或油易流出,既損壞了標本,又污染載物臺,也影響檢查結(jié)果。
鏡檢時應(yīng)將標本按一定方向移動視野,直至整個標本觀察完畢,以便不漏檢,不重復(fù)。
顯微鏡的重光為對光,接物鏡的轉(zhuǎn)換及光線的調(diào)節(jié)。觀察寄生蟲標本時,光線調(diào)節(jié)甚為重要。因為所觀察的標本如蟲卵、包囊等,均為自然光狀態(tài)的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無色透明,而低倍、高倍接物鏡轉(zhuǎn)換較多,故須隨著鏡檢時對不同標本和要求,需要隨時調(diào)節(jié)焦距和光線,這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下,染色標本光線宜強,無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱,高倍鏡觀察光線宜強。
1. 對光
:(1)將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒下方與鏡筒成一直線。
(2)撥動反光鏡,調(diào)節(jié)至視野最亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面,光源強時用平面,較暗時用凹面,需要強光時,將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時,將聚光器降低,或光圈適當縮小。
(3)將待觀察的標本置載物臺上,轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。于轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器的同時,須俯身在鏡旁仔細觀察接物鏡與標本之間的距離。
(4)左眼于接目鏡觀察,同時左手轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié),使鏡筒徐徐上升以調(diào)節(jié)焦距,使視野內(nèi)的物象看到上時即停,再調(diào)微調(diào)節(jié)器,至標本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié):
顯微鏡一般具有三個接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤孔中。觀察標本時,先使用低倍接物鏡,此時,視野較大,標本較易查出,但放大倍數(shù)較小(一般放大100倍),較小的物體不易觀察其結(jié)構(gòu)。高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大(一般放大400倍),能觀察微小的物體或結(jié)構(gòu)。
寄生蟲的蠕蟲卵,微絲蚴,原蟲的滋養(yǎng)體及包囊,昆蟲的幼蟲,均使用低、高倍鏡。組織細胞內(nèi)的原蟲,則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察,如在低倍鏡下不能準確鑒定所見的物體或其內(nèi)部構(gòu)造時,則轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。使用油鏡觀察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進行鏡檢觀察。
3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別:
(1)標明放大倍數(shù)10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.25。
(2)低倍鏡最短,高倍鏡較長,油鏡最長。
(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小。
(4)油鏡頭上常刻有黑色環(huán)圈,或“油”字。
4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法:
(1)光線對好后,移動推進器尋找需要觀察的標本。
(2)如標本的體積較大,不能清楚查見其構(gòu)造因而不能確認時,則將標本移至視野中央,再旋轉(zhuǎn)高倍接物鏡于鏡筒下方。
(3)旋轉(zhuǎn)微調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。
(4)調(diào)節(jié)聚光器及光圈,使視野內(nèi)的物象達到最清晰的程度。
5. 油鏡的使用方法:
(1)原理:使用油鏡觀察時,需加香柏油,因為油鏡需要進入鏡頭的光線多,但油鏡的透氣孔最小,這樣進入的光線就少,物體不易看清楚。同時又因自玻片透過的光線,由于介質(zhì)(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片:n=1.52,空氣:n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光,因此射入鏡頭的光線就更少,物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油,加于標本與玻片之間,使光線不通過空氣,這樣射入鏡頭的光線就較多,物象就看得清楚。
(2)油鏡的使用:
a.將光線調(diào)至最強程度(聚光器提高,光圈全部開放)。
b.轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過多,不要涂開)于接物鏡正下方標本上。
c.轉(zhuǎn)動接物鏡轉(zhuǎn)換盤,使油鏡頭于鏡筒下方。
d.俯身鏡旁側(cè)面在肉眼的觀察下,轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內(nèi),輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止。
f.轉(zhuǎn)動微調(diào)節(jié)器,使視野物象達到最清晰的程度。
g.左手徐徐移動推進器,并轉(zhuǎn)動微調(diào)節(jié)器以觀察標本。
h.標本觀察完畢后,轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器將鏡筒升起,取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。
6. 注意事項:
(1)使用顯微鏡之前,應(yīng)熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法,特別應(yīng)掌握識別三種接物鏡之特征。
(2)寄生蟲學實習中所觀察的標本,大多數(shù)為無色和顏色較淺,因此必須注意光線的調(diào)節(jié)。
(3)新鮮標本觀察時,須加蓋玻片,以免標本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡,同時可使標本表面勻平,光線得以集中,有利于觀察。
顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法經(jīng)典例題
將寫有“生物”字樣的臨時玻片標本放在顯微鏡下觀察,正確操作應(yīng)看到的圖像是
答案 :
D
請根據(jù)下圖回答相關(guān)問題.
(1)圖①中,轉(zhuǎn)動[ ]粗準焦螺旋時,鏡筒的升降范圍較大.
(2)臨時裝片的制作主要有擦片、滴液、取材、 蓋片、染色五步,圖②是其中的哪一步驟? ________
(3)制作人體口腔上皮細胞臨時裝片時,需要染色(如圖③),通常所用的染液是________.
(4)圖④和圖⑤中,哪一幅是觀察班的人體口腔上皮細胞? ________.因為人體口腔上皮細胞沒有________ (寫出一點即可).
(5)圖④中,在顯微鏡下看到的顏色最深的是細胞中的哪一結(jié)構(gòu)? ________
答案 :
(1)6(2)蓋片(3)碘液(4)⑤細胞壁(5)細胞核
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